从细胞、组织或酵母中纯化至多100μg的总RNA
数分钟内快速纯化得到高品质总RNA
即用型RNA在各种下游应用中表现良好
少量起始样本,RNA产量稳定
无需酚/ 氯仿抽提,无需氯化铯梯度离心,无氯化锂或者乙醇沉淀步骤
Performance
RNeasy Mini Kit可从至多30 mg动物或人类组织样本,或从100–1 x 107个动物或人类细胞样本或酵母中纯化总RNA(参见"RT-PCR of RNA from as few as 100 cells"和"High-quality RNA from a variety of samples")。
Principle
RNeasy Mini Kit可从少量的样本中高效纯化总RNA。RNeasy纯化技术整合了苯酚/异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度,简化了总RNA纯化技术。纯化得到高品质的RNA,并且DNA残留水平达到最低。
Procedure
RNeasy Mini Kit可从10–1 x 107个动物或人类细胞中、0.5–30 mg动物或人类组织中或小于5 x 107个酵母细胞中方便的纯化总RNA。先对样本进行破碎和匀浆。在裂解物中加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将裂解物上样至RNeasy硅胶膜(参见"RNeasy Mini spin column")。RNA结合到膜上(最多可结合100 µg),污染物被高效洗去。对于某些对少量DNA十分敏感的RNA应用,可在RNeasy操作过程中进行柱上DNA酶处理,去除DNA残留。之后可在30–100 µl的纯水洗脱液中得到高浓度的纯化RNA(参见"RNeasy Mini procedure")。还有各种特殊应用的实验方案可供选择。
使用RNeasy技术纯化得到的RNA的A260/280比为1.9–2.1(10 mM Tris·Cl、pH 7.5的溶液中),适用于多种下游应用,包括:
Northern印迹、点印迹和狭缝印迹
终点式RT-PCR
定量real-time RT-PCR
芯片分析
Poly A+ RNA筛选