实时荧光定量 PCR、数字 PCR 与传统 PCR 对比 - 产品知识 - 售后与服务

实时荧光定量 PCR、数字 PCR 与传统 PCR 对比

发布时间：2024-09-17 浏览次数：51

实时荧光定量 PCR、传统 PCR 与数字 PCR 概述

	数字 PCR	实时荧光定量 PCR	传统 PCR
概述	测量阴性平行样的比例以确定绝对拷贝数。	在发生 PCR 扩增时进行测量。	在 PCR 循环结束时测量积聚的 PCR 产物的量。
定量？	是，阴性 RCR 反应的比例适合泊松统计算法。	是，因为在 PCR 的指数（对数）期内采集数据，在此期间 PCR 产物的数量与核酸模板的量成正比。	否，但是比较凝胶上的扩增条带的强度与已知浓度的标准品可为您提供“半定量”结果。
应用	病毒载荷绝对定量核酸标准品绝对定量下一代测序文库绝对定量稀有等位基因检测基因表达绝对定量混合物富集和分离	基因表达定量芯片验证质量控制和检测验证病原体检测 SNP 基因分型拷贝数变异 microRNA 分析病毒定量 siRNA/RNAi 实验	DNA 扩增用于：测序基因分型分子克隆
总结	数字 PCR 的优点：无需依赖参考物或标准品通过增加 PCR 平行样的总数可实现所需的精度高度耐受抑制剂能够分析复杂混合物与传统 qPCR 不同，数字 PCR 对出现的拷贝数呈线性反应，可以检测到较小倍数变化的差异。	实时荧光定量 PCR 的优点：提高检测的动态范围无需 PCR 后处理检测能够覆盖低至 2 倍的变化在 PCR 的指数期内采集数据报告基团荧光信号的增加与生成的扩增子数量成正比裂解探针提供扩增子的永久裂解记录	传统 PCR 的缺点：精确度差灵敏度低动态范围小 < 2 logs 分辨率低非自动化仅限基于规格的区别分析结果未表示为数字使用溴化乙锭染色不足以定量 PCR 后处理

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